檢測領域

檢測項目

生物樣品中氨基酸含量檢測

一、實驗原理

   斯坦德檢測中心參照國標GB/T 5009.124-2003食品中氨基酸的測定,試樣蛋白質經鹽酸水解成為游離氨基酸,經氨基酸自動分析儀的離子交換柱分離后,與茚三酮溶液產生顏色反應,再通過分光光度計比色測定氨基酸含量。

二、儀器和試劑

   L-8900氨基酸自動分析儀,DHG-9203J型恒溫干燥箱,DZF-6050型真空干燥器,真空泵;高純氮氣(純度為99.99%)。

三、試驗方法

1、稱樣

   樣品經粉碎后,用電子天平準確稱量樣品,精確到0.0001g(使樣品蛋白質含量10mg~20mg范圍內),將稱好的樣品放于水解管中。

2、水解

   在水解管中加入6mol/L鹽酸15mL,加入新蒸餾的苯酚3~4滴,再將水解管放入冰水中,冰凍3~5min,再接到真空泵的抽氣管上,抽完真空后沖入高純氮氣;再抽真空充氮氣,重復三次后,在充滿氮氣的狀態下封口。將已封口的水解管放在110℃±1℃的恒溫干燥箱內,水解22h后,取出,冷卻。

   打開水解管,將水解液過濾后,用去離子水多次沖洗水解管,將水解液全部轉移到50mL容量瓶內,用去離子水定容,吸取濾液1mL于5mL容量瓶內,用真空干燥器在40℃~50℃干燥,殘留物用1~2mL水溶解,再干燥,反復進行兩次,最后蒸干,用1mLpH2.2的緩沖液溶解,供儀器測定用。

四、結果計算與評價

   斯坦德檢測中心利用外標法計算各種氨基酸含量。


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